|
VerteKit - synteza pierwszej nici cDNA, 100 reakcji
VerteKit - zestaw przeznaczony do syntezy pierwszej nici cDNA pozwala na otrzymanie pełnorozmiarowej nici cDNA przepisanej przez odwrotną transkryptazę M-MLV z RNA. Rozmiar syntezowanego cDNA ze względu na szczątkową aktywność RNA-zy H odwrotnej transkryptazy może dochodzić nawet do 5 kpz. Czas minimalny potrzebny do syntezy cDNA wynosi około 30 min. Standardowy czas potrzebny na otrzymanie cDNA wynosi 1 godz. 30min.
W celu otrzymania pierwszej nici cDNA można zastosować rozmaite typy starterów reakcji. Każdy typ startera ze względu na swoje indywidualne właściwości może zostać zastosowany do planowania specyficznej syntezy cDNA.
6-nukleotydowe startery losowe (random hexaprimers) - krótkie i niespecyficznie wiążą się z mRNA na całej jego długości. Idealne w zastosowaniu w przypadku trudnych matryc, w których struktury drugorzędowe utrudniają proces przepisania mRNA na cDNA. Zalecane do syntezy cDNA z 5’ końca mRNA.
Skład zestawu:
| MMLV odwrotna transkryptaza |
200u/ul |
10 000 |
50ul |
|
| Bufor MMLV pH 8.3 |
|
|
300ul |
|
| dNTPs MIX |
1,5mM |
|
400ul |
|
| random primers |
OD15 |
100 reak. |
100ul |
|
| H2O |
RNA-se free |
|
2mL |
|
|
DNA Polymerases
Odwrotne transkryptazy
