VerteKit - synteza pierwszej nici cDNA, 100 reakcji

VerteKit - zestaw przeznaczony do syntezy pierwszej nici cDNA pozwala na otrzymanie pe³norozmiarowej nici cDNA przepisanej przez odwrotn± transkryptazê M-MLV z RNA. Rozmiar syntezowanego cDNA ze wzglêdu na szcz±tkow± aktywno¶æ RNA-zy H odwrotnej transkryptazy mo¿e dochodziæ nawet do 5 kpz. Czas minimalny potrzebny do syntezy cDNA wynosi oko³o 30 min standardowy czas potrzebny na otrzymanie cDNA wynosi 1 godz. 30min.

W celu otrzymania pierwszej nici cDNA mo¿na zastosowaæ rozmaite typy starterów reakcji. Ka¿dy typ startera ze wzglêdu na swoje indywidualne w³a¶ciwo¶ci mo¿e zostaæ zastosowany do planowania specyficznej syntezy cDNA.

Oligo (dT)15 startery - Umo¿liwiaj± syntezê pierwszej nici cDNA z 3’ koñca mRNA - poli(A). Wygodne w zastosowaniu umo¿liwiaj± synteze cDNA na matrycy mRNA którego d³ugo¶æ nie przekracza 5kpz. Otrzymane cDNA mo¿na przeznaczyæ do dalszego zastosowania w reakcji PCR lub do hybrydyzacji typu Northern blot.

MMLV odwrotna transkryptaza	200u/ul	10 000	50ul
Bufor MMLV pH 8.3			300ul
dNTPs MIX	1,5mM		400ul
oligo(dT)15	50ug	100 reak.	100ul
H2O	RNA-se free		2mL