|
Przeznaczone do dwuetapowej reakcji RT-PCR. W skład zestawów wchodzą: Odwrotna transkryptaza Verte MMLV, bufor reakcyjny (10x), mieszanina dNTPs, woda wolna od RNA-z oraz RED AllegroTaq polimeraza DNA.
Synteza pierwszej nici cDNA odbywa się za pomocą odwrotnej transkryptazy Verte MMLV enzymu bedącego produktem genu pol mysiego wirusa leukemii Moloneya. Dzięki swojej aktywności Polimerazy DNA zależnej od RNA Verte MMLV pozwala na synteze cDNA o długości do 5000pz. W przciwieństwie od odwrotnej transkryptazy AMV (Avian Mieloblastosis Virus) odwrotna transkryptaza M-MLV posiada tylko szczątkową aktywności RNAazy H.
Zestaw VertePlus zawiera startery random primers.
Skład zestawów obliczony jest na przeprowadzenie 100 reakcji RT-PCR:
| MMLV odwrotna transkryptaza |
200u/ul |
10000u |
50ul |
|
| Bufor MMLV pH 8.3 |
|
|
300ul |
|
| dNTPs MIX |
1,5mM |
|
400ul |
|
| random primers |
OD15 |
100 reak. |
100ul |
|
| REDAllegroTaq polimeraza DNA |
2.5u/ul |
250u |
100ul |
|
| Bufor Taq pH 8.6 25mM MgCl2(10x) |
|
|
2mL |
|
| H2O |
RNA-se free |
|
2mL |
|
|
DNA Polymerases
Odwrotne transkryptazy
