|
Verte M-MLV jest odwrotną transkryptazą produktem genu pol Mysiego Wirusa Leukemii Moloneya.
Umożliwia syntezę cDNA o długości do 5kpz. Idealna do przeprowadzania standardowej reakcji RT-PCR (reverse transcription PCR). W pierwszym etapie reakcji na matrycy RNA odbudowuje komplementarną pojedynczą nić DNA (tzw. first stand). Działa z różnymi rodzajami starterów:
- startery specyficzne dla znanej sekwencji genomu (GSP)
- startery oligo(dT)15 – hybrydyzujące do charakterystycznej dla mRNA sekwencji poly(A)
- hexamery (6-ciomery) tzw. Random Hexamer Primers (RH) – amplifikujące losowe fragmenty RNA o rożnej długości (szczególnie przydatne w technikach fingerprinting).
W odróżnieniu od odwrotnej transkryptazy AMV (Avian Mieloblastosis Virus) M-MLV posiada tylko szczątkową aktywności RNazy H, która przejawia się specyficzną degradacją nici RNA w hybrydach RNA:DNA.
Bufor reakcyjny z Mg 2+ (x10): 700 mM Tris-HCl pH 8.3/25C, 166 mM (NH4)2SO4, 75 mM MgCl2
Stężenie: 200u/ul
Przechowanie: - 20C
|
DNA Polymerases
